Vaj i pastër Saposhnikovia divaricata për qiri dhe sapun për prodhimin e vaj esencial shpërndarës me shumicë i ri për difuzorët e kallamit

përshkrim i shkurtër:

2.1. Përgatitja e SDE

Rizomat e SD janë blerë si barishte e tharë nga Hanherb Co. (Guri, Kore). Materialet bimore u konfirmuan taksonomikisht nga Dr. Go-Ya Choi i Institutit Korean të Mjekësisë Orientale (KIOM). Një ekzemplar kupon (numri 2014 SDE-6) u depozitua në Herbariumin Korean të Burimeve Standarde Bimore. Rizomat e thara të SD (320 g) u ekstraktuan dy herë me 70% etanol (me një refluks 2 orë) dhe ekstrakti u përqendrua më pas nën presion të reduktuar. Zierja filtrohet, liofilizohet dhe ruhet në 4°C. Rendimenti i ekstraktit të tharë nga lëndët fillestare të papërpunuara ishte 48.13% (w/w).

2.2. Analiza sasiore e kromatografisë së lëngshme me performancë të lartë (HPLC).

Analiza kromatografike u krye me një sistem HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) dhe një detektor me grup fotodiode. Për analizën HPLC të SDE, prim-O-Standardi i glucosylcimifugin u ble nga Instituti i Promovimit të Koresë për Industrinë e Mjekësisë Tradicionale (Gyeongsan, Kore), dhesek-O-glukozilhamaudol dhe 4'-O-β-D-glukozil-5-O-metilvisamminol u izolua brenda laboratorit tonë dhe u identifikua nga analizat spektrale, kryesisht nga NMR dhe MS.

Mostrat SDE (0.1 mg) u tretën në 70% etanol (10 mL). Ndarja kromatografike u krye me një kolonë XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, SHBA). Faza e lëvizshme përbëhej nga acetonitrili (A) dhe 0,1% acid acetik në ujë (B) me një shpejtësi rrjedhjeje prej 1,0 mL/min. Një program gradient me shumë hapa u përdor si më poshtë: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min) dhe 20-65% A (23-40 min ). Gjatësia e valës së zbulimit u skanua në 210-400 nm dhe u regjistrua në 254 nm. Vëllimi i injektimit ishte 10.0μL. Tretësirat standarde për përcaktimin e tre kromoneve u përgatitën në një përqendrim përfundimtar prej 7,781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukozil-5-O-metilvisamminol), dhe 31,125 mg/mL (sek-O-glucosylhamaudol) në metanol dhe ruhet në 4°C.

2.3. Vlerësimi i Aktivitetit AntiinflamatorIn Vitro

2.3.1. Kultura e qelizave dhe trajtimi i mostrës

Qelizat RAW 264.7 u morën nga Koleksioni Amerikan i Kulturës së Tipit (ATCC, Manassas, VA, USA) dhe u rritën në mjedis DMEM që përmban 1% antibiotikë dhe 5.5% FBS. Qelizat u inkubuan në një atmosferë të lagësht prej 5% CO2 në 37°C. Për të stimuluar qelizat, mediumi u zëvendësua me medium të freskët DMEM, dhe lipopolisakaridi (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) në 1μg/mL u shtua në prani ose mungesë të SDE (200 ose 400μg/mL) për 24 orë shtesë.

2.3.2. Përcaktimi i oksidit nitrik (NO), prostaglandinës E2 (PGE2), faktorit të nekrozës së tumorit-α(TNF-α), dhe Prodhimi i Interleukin-6 (IL-6).

Qelizat u trajtuan me SDE dhe u stimuluan me LPS për 24 orë. Prodhimi i NO u analizua duke matur nitritin duke përdorur reagentin Griess sipas një studimi të mëparshëm [12]. Sekretimi i citokinave inflamatore PGE2, TNF-α, dhe IL-6 u përcaktua duke përdorur një komplet ELISA (sistemet R&D) sipas udhëzimeve të prodhuesit. Efektet e SDE në prodhimin e NO dhe citokinës u përcaktuan në 540 nm ose 450 nm duke përdorur një Wallac EnVision™lexues mikropllakash (PerkinElmer).

2.4. Vlerësimi i Aktivitetit të AntiosteoartrititIn Vivo

2.4.1. Kafshët

Minjtë meshkuj Sprague-Dawley (7 javësh) u blenë nga Samtako Inc. (Osan, Kore) dhe u vendosën në kushte të kontrolluara me një cikël 12-orësh dritë/errësirë në°C dhe% lagështia. Minjve iu dha një dietë laboratorike dhe ujëad libitum. Të gjitha procedurat eksperimentale u kryen në përputhje me udhëzimet e Institutit Kombëtar të Shëndetit (NIH) dhe të miratuara nga Komiteti i Kujdesit dhe Përdorimit të Kafshëve të universitetit Daejeon (Daejeon, republika e Koresë).

2.4.2. Induksioni i OA me MIA në Rats

Kafshët u ndanë rastësisht dhe u caktuan në grupet e trajtimit përpara fillimit të studimit (për grup). Tretësirë MIA (3 mg/50μL 0.9% fiziologjik) u injektua drejtpërdrejt në hapësirën intra-artikulare të gjurit të djathtë nën anestezi të induktuar me një përzierje ketamine dhe ksilazine. Minjtë u ndanë rastësisht në katër grupe: (1) grupi i kripur pa injeksion MIA, (2) grupi MIA me injeksion MIA, (3) grupi i trajtuar me SDE (200 mg/kg) me injeksion MIA, dhe (4 ) grupi i trajtuar me indometacinë (IM-) (2 mg/kg) me injeksion MIA. Minjtë u administruan nga goja me SDE dhe IM 1 javë para injektimit MIA për 4 javë. Doza e SDE dhe IM e përdorur në këtë studim u bazua në ato të përdorura në studimet e mëparshme [10,13,14].

2.4.3. Matjet e shpërndarjes së peshës së këmbës së pasme

Pas induksionit të OA, ekuilibri origjinal në aftësinë për të mbajtur peshën e putrave të pasme u ndërpre. Një testues i paaftësisë (Instrumentation Linton, Norfolk, MB) u përdor për të vlerësuar ndryshimet në tolerancën e mbajtjes së peshës. Minjtë u vendosën me kujdes në dhomën matëse. Forca mbajtëse e peshës e ushtruar nga gjymtyrët e pasme u vlerësua në një periudhë 3 s. Raporti i shpërndarjes së peshës u llogarit me ekuacionin e mëposhtëm: [pesha në gjymtyrën e pasme të djathtë / (pesha në gjymtyrën e pasme të djathtë + pesha në gjymtyrën e pasme të majtë)] × 100 [15].

2.4.4. Matjet e niveleve të citokinës në serum

Mostrat e gjakut u centrifuguan në 1,500 g për 10 minuta në 4°C; më pas serumi u mblodh dhe u ruajt në -70°C deri në përdorim. Nivelet e IL-1β, IL-6, TNF-α, dhe PGE2 në serum u matën duke përdorur komplete ELISA nga R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) sipas udhëzimeve të prodhuesit.

2.4.5. Analiza sasiore RT-PCR në kohë reale

ARN totale u nxor nga indi i kyçit të gjurit duke përdorur reagentin TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), i transkriptuar në mënyrë të kundërt në cDNA dhe i përforcuar me PCR duke përdorur një kit TM One Step RT PCR me SYBR jeshile (Applied Biosystems , Grand Island, NY, SHBA). PCR sasiore në kohë reale u krye duke përdorur sistemin Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, SHBA). Sekuencat e primerit dhe sekuenca e sondës janë paraqitur në Tabelën1. Pjesë të cDNA-ve të mostrës dhe një sasi e barabartë cDNA GAPDH u përforcuan me përzierjen kryesore TaqMan® Universal PCR që përmban ADN polimerazë sipas udhëzimeve të prodhuesit (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Kushtet e PCR ishin 2 min në 50°C, 10 min në 94°C, 15 s në 95°C dhe 1 min në 60°C për 40 cikle. Përqendrimi i gjenit të synuar u përcaktua duke përdorur metodën krahasuese Ct (numri i ciklit të pragut në pikën e kryqëzimit midis grafikut të amplifikimit dhe pragut), sipas udhëzimeve të prodhuesit.

Çmimi FOB:0,5 - 9,999 dollarë amerikanë / copë

Min.Sasia e porosisë:100 Copë/Copë

Aftësia e furnizimit:10000 Copë/Copë në muaj

Na dërgoni email

Detajet e produktit

Etiketat e produktit

Osteoartriti (OA) është çrregullimi muskuloskeletor më i shpeshtë dhe sëmundja më e zakonshme degjenerative e kyçeve tek të moshuarit.1]. OA është një gjendje e shkaktuar pjesërisht nga dëmtimi, humbja e strukturës dhe funksionit të kërcit, dhe disrregullimi i rrugëve proinflamatore dhe anti-inflamatore.2,3]. Ai prek kryesisht kërcin artikular dhe kockën subkondrale të nyjeve sinoviale dhe rezulton në dështim të kyçeve, duke çuar në dhimbje gjatë mbajtjes së peshës, duke përfshirë ecjen dhe qëndrimin në këmbë.4].

Nuk ka shërim për OA, pasi është shumë e vështirë të rivendoset kërci pasi ai shkatërrohet [5]. Qëllimet e trajtimit janë lehtësimi i dhimbjes, ruajtja ose përmirësimi i lëvizshmërisë së kyçeve, rritja e forcës së nyjeve dhe minimizimi i efekteve paaftësuese të sëmundjes. Trajtimet farmakologjike të OA synojnë të reduktojnë dhimbjen në mënyrë që të rrisin funksionin e kyçeve dhe cilësinë e jetës së pacientit. Edhe pse shkatërrimi i kërcit është ngjarja kryesore në OA, degradimi i kolagjenit është incidenti themelor që përcakton përparimin e pakthyeshëm të OA në lidhje me inflamacionin.6,7]. Trajtimet me aktivitet anti-inflamator dhe kondroprotektiv pritet të lehtësojnë dhimbjen dhe të ruajnë integritetin e matricës në pacientët me OA.

Prandaj, ulja e inflamacionit ka të ngjarë të jetë e dobishme në menaxhimin e OA. Studimet e fundit sugjerojnë role mbrojtëse për burimet bimore në përparimin e OA, për sa i përket zbutjes së inflamacionit të kondrociteve dhe shkatërrimit të mëtejshëm të kërcit, nëpërmjet aftësisë së tyre për të ndërvepruar me indet e lidhura me kyçet, duke rezultuar në zbutjen e dhimbjes së kyçeve.8].

Rrënja eSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) është përdorur gjerësisht në mjekësinë tradicionale për trajtimin e dhimbjes së kokës, dhimbjes, inflamacionit dhe artritit në Kore dhe Kinë.9,10]. Efektet e ndryshme farmakologjike tëSaposhnikovia divaricata(SD) përfshin gjithashtu veti anti-inflamatore, analgjezike, antipiretike dhe antiartritike [9,11]. Një studim i fundit tregoi se ekstrakti i kromonit SD posedon efekte të mundshme të artritit antireumatoid në një model miu të artritit të induktuar nga kolagjeni.10]; megjithatë, pak studime janë kryer për të mbështetur aktivitetin anti-inflamator dhe antiartrit tëSaposhnikovia divaricataekstrakt (SDE).

Prandaj, studimi aktual hetoi aktivitetet anti-inflamatore dhe antiosteoartriti të një ekstrakti 70% etanol të SD. Së pari, u vlerësua efekti anti-inflamator i SDEin vitronë qelizat RAW 264.7 të induktuara nga LPS. Më pas, efekti antiosteoartrit i SDE u mat duke vlerësuar shpërndarjen e peshës, degradimin e kërcit artikular dhe përgjigjet inflamatore në një model të miut të OA të induktuar nga jodoacetati monosodium (MIA-).